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[Bio101] Rapid Coomassie Protein SDS-gel Staining
[Bio101] SDS-胶快速考马斯亮蓝染色法   

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本文章节

Abstract

This is a fast gel-staining protocol (within 10 minutes) compared to the conventional coomassie staining with the same detecting sensitivity.

Materials and Reagents

  1. Ethanol
  2. Acetic acid
  3. Coomassie brilliant blue R250
  4. Solution I (see Recipes)
  5. Solution II (see Recipes)
  6. Coomassie stock solution (see Recipes)

Equipment

  1. Aluminum foil
  2. Rocker

Procedure

  1. Transfer gel to 50 ml of Solution I.
  2. Heat in microwave oven for ~25 sec.
  3. Cool in rocker for 5 to 10 min.
  4. Add 200 μl of Coomassie stock solution to 50 ml of Solution II.
  5. Transfer gel to Solution II + Coomassie.
  6. Heat in microwave oven for ~35 sec.
  7. Cool in rocker for 5 to 10 min.
  8. Observe bands on the gel.
    Note: Staining is not complete after these 5 to 10 min and faint bands may take longer to become visible.

Recipes

  1. Solution I
    50% ethanol
    10% acetic acid
  2. Solution II
    5% ethanol
    7.5% acetic acid
  3. Coomassie stock solution
    0.25% Coomassie brilliant blue R250 in 95% ethanol

References

  1. Studier, F. W. (2005). Protein production by auto-induction in high density shaking cultures. Protein Expr Purif 41(1): 207-234.

简介

与具有相同检测灵敏度的常规考马斯染色相比,这是快速凝胶染色方案(在10分钟内)。

材料和试剂

  1. 乙醇
  2. 醋酸
  3. 考马斯亮蓝R250
  4. 解决方案I(见配方)
  5. 解决方案II(参见配方)
  6. 考马斯储备溶液(见配方)

设备

  1. 铝箔
  2. 摇杆

程序

  1. 将凝胶转移至50ml溶液I.
  2. 在微波炉中加热〜25秒。
  3. 在摇臂中冷却5至10分钟。
  4. 加入200μl考马斯储备溶液到50ml溶液II。
  5. 将凝胶转移至溶液II +考马斯。
  6. 在微波炉中加热〜35秒。
  7. 在摇臂中冷却5至10分钟。
  8. 观察凝胶上的条带。
    注意:这些5到10分钟后,染色不完全,而且暗淡的条纹可能需要更长时间才能看见。

食谱

  1. 解决方案I
    50%乙醇
    10%乙酸
  2. 解决方案II
    5%乙醇
    7.5%乙酸
  3. 考马斯储备液
    0.25%考马斯亮蓝R250在95%乙醇中的溶液

参考文献

  1. Studier,F.W。(2005)。 在高密度摇动培养中通过自动诱导产生蛋白质。蛋白质 Purif 41(1):207-234。
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Copyright: © 2017 The Authors; exclusive licensee Bio-protocol LLC.
引用:Yan, Q. (2011). Rapid Coomassie Protein SDS-gel Staining. Bio-protocol Bio101: e83. DOI: 10.21769/BioProtoc.83;
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