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[Bio101] DAPI Nuclear Staining of Live Worm
[Bio101] 活蠕虫中DAPI核染色   

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Abstract

Adapted from the Villenueve Lab at Stanford University. This is a very simple method using ethanol fixation, but works very well.

Materials and Reagents

  1. Vectashield Mounting Media (Vector Labs)
  2. M9 solution
  3. 95% ethanol
  4. DAPI solution

Equipment

  1. Fluorescence microscope (Leica)
  2. Whatman paper
  3. Coverslip
  4. Nail polish

Procedure

  1. Pick worms in M9 solution (see common worm media and buffers) onto your slide.
  2. Wick away extra liquid by Whatman paper.
  3. Add 95% ethanol and let dry (usually 10~20 μl); repeat 3x.
  4. Add DAPI solution with vectashield (or other mounting media).
  5. Cover with coverslip and seal with nail polish; let sit in the dark ~10 min.
  6. The slides can then be visualized.

简介

改编自斯坦福大学的Villenueve实验室。 这是一个非常简单的方法使用乙醇固定,但工作非常好。

材料和试剂

  1. Vectashield固定媒体(矢量实验室)
  2. M9解决方案
  3. 95%乙醇
  4. DAPI解决方案

设备

  1. 荧光显微镜(Leica)
  2. Whatman纸
  3. 盖玻片
  4. 指甲油

程序

  1. 在M9解决方案中选择蠕虫(请参阅常见蠕虫媒介和缓冲区)到您的 滑动
  2. 用Whatman纸吸去多余的液体。
  3. 加入95%乙醇,让其干燥(通常10〜20μl); 重复3x。
  4. 使用vectashield(或其他加载介质)添加DAPI解决方案。
  5. 盖子用盖子和密封有指甲油; 让坐在黑暗中〜10分钟。
  6. 然后可以可视化幻灯片。
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Copyright: © 2011 The Authors; exclusive licensee Bio-protocol LLC.
引用:He, F. (2011). DAPI Nuclear Staining of Live Worm. Bio-protocol Bio101: e77. DOI: 10.21769/BioProtoc.77;
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